本文原载于《中华临床感染病杂志》年第4期
具核梭杆菌(Fusobacteriumnucleatum,Fn)属拟杆菌科梭杆菌属，是革兰氏阴性无芽孢厌氧菌，是人类口腔和肠道的共生菌群[1,2]，在肠道粘液层和结肠腺窝定植[3,4]，有5种亚型，分别为具核亚种、多型亚种、梭型亚种、文氏亚种和动物亚种[5]。肠道菌群研究发现，某些结直肠疾病与Fn感染具有明显相关性[6,7,8]，推测Fn可能通过血液或经消化道传播，影响结直肠疾病的发生、发展及预后，同时发现Fn能够促进结直肠肿瘤的转移[9,10]。进一步机制研究发现，Fn菌体表面的具核梭杆菌黏附蛋白A(FusobacteriumnucleatumadhesinA,FadA)是介导Fn黏附、侵袭宿主细胞的主要致病因素[11,12]。本文对Fn菌体表面的FadA生物学功能及Fn与结直肠疾病的相关性研究进行综述。
1 具核梭杆菌黏附蛋白A
细菌黏附、侵袭宿主细胞，是机体致病的重要原因[13]。研究发现Fn菌体表面的FadA是介导其发挥黏附、侵袭作用的主要因素[11,14]。FadA具有高度保守性，与已知细菌黏附素无同源性，仅在口腔源性梭菌属表面发现[1,9]。国外学者通过FadA基因互补实验证实，FadA基因缺失组的Fn增殖能力较正常组减慢[11]，并且对口腔上皮细胞及中华仓鼠卵巢细胞的黏附、侵袭能力减弱[1]。将FadA基因片段缺失的Fn和正常Fn分别注入孕期小鼠体内，前组较后组小鼠脐带血内的白介素-6(IL-6)、角质细胞趋化因子(KC)及C-反应蛋白(CRP)等炎症因子水平明显降低，推测FadA的表达与Fn的黏附、侵袭、增殖及促炎作用密切相关[15]。
FadA为小分子蛋白，约13.6kD，以未成熟的Pre-FadA和分泌形式的成熟FadA(mFadA)2种方式存在。Pre-FadA由个氨基酸组成，存在于菌体胞膜内侧，与mFadA主要的区别在于，具有由18个氨基酸组成的单个信号肽区域。mFadA由个氨基酸组成，位于菌体胞膜表面，mFadA单体通过亮氨酸链构成非α-螺旋发夹环丝状结构的晶体状态，该结构被证实是Fn发挥作用的重要部位[12,16]。两种形式的FadA可以以不同比例组合形成不同高相对分子质量复合物(FadAc)，联通Fn细胞膜内外，介导细菌的黏附、侵袭过程[16,17,18]。不同亚型Fn表面的FadAc中Pre-FadA和mFadA的比例不同。滴度实验发现，FadAc中Pre-FadA只有达到一定比例时，才能够发挥介导细菌黏附、侵袭的生物学作用。研究显示Pre-FadA信号肽区域氨基酸突变，会明显影响Fn的黏附能力，推测Pre-FadA信号肽区域决定FadAc的形态结构进而调控Fn的黏附能力[19]。
国内外学者对Fn致病机制研究发现[20,21]，宿主细胞膜上的内皮细胞钙黏蛋白(Endothelialcadherin,E-cadherin)是Fn附着细胞的必需条件，E-cadherin是一种肿瘤抑制因子，在细胞与细胞间的连接发挥重要作用。研究证实Fn无法黏附和侵入不表达E-cadherin的结肠癌细胞，推测E-cadherin是宿主细胞表面FadA的受体[12,20,22]。进一步研究发现FadA与E-cadherin的-区域结合，可使E-cadherin离开细胞与细胞连接处，向胞内转移，血管内皮细胞完整性改变，血管通透性增加，从而使Fn通过E-cadherin介导的细胞间结点穿过血管内皮，进入血液循环播散至机体其它部位。研究还发现，Fn可通过"FadA依赖机制"协助其它细菌的侵入，即FadA通过与E-cadherin结合，增加血管内皮通透性，促进其它微生物的系统性传播[23,24,25]。
2 Fn与结直肠疾病
Fn为口腔源性菌，在消化道内也可检测到，有人提出以下两种可能的播散机制：(1)牙龈袋内的Fn，通过牙龈溃疡入血传播，从而播散至胃肠道，参与某些疾病进展[26]；(2)由于吞咽口腔菌，Fn通过胃肠道播散至消化道内[10]。多位学者对各种消化系统疾病患者的Fn感染检出率进行调查，结果如表1。研究显示，Fn在炎症性肠病(Inflammatoryboweldisease，IBD)、结肠腺瘤及结直肠癌(Colorectalcarcinoma,CRC)等病变组织中丰度增加，因此推测Fn可能是上述疾病发生的危险因素之一[7,9,27]。
2.1 Fn与阑尾炎
急性阑尾炎的病因，过去被认为主要是异物阻塞诱发黏膜炎症。Swidsinski等[28]对德国柏林70例急性阑尾炎患者病变组织进行菌群检测，发现菌群感染与阑尾炎发病关系密切，肠道内梭菌属感染检出率为62%，梭菌属以Fn为主，而在正常组织Fn感染检出率1%，俄罗斯及中国地区患者检出率结果与之相近。卡它性阑尾炎患者梭菌属检出率为52%，化脓性阑尾炎患者检出率为70%，均以Fn为主，而急性阑尾炎患者直肠拭子检测未发现梭杆菌[32]。目前发现Fn与阑尾炎发病的相关机制包括：(1)激活细胞信号通路影响细胞骨架结构，包括肌动蛋白、微管等，发挥侵袭作用；(2)诱导外周血单核细胞和外周血多形核细胞的凋亡，从而逃避免疫杀伤细胞；(3)由于细胞壁外膜中存在内毒素，其毒力作用可导致不同程度的肠道炎症反应，诱发阑尾炎。Fn感染可能与阑尾炎密切相关，并且与疾病严重程度呈正相关[32]。
2.2 Fn与IBD
肠黏膜作为消化系统抵御外界侵害的第一道防线，肠上皮细胞合成与释放各种分子在粘膜免疫中发挥重要作用，使机体在疾病与健康状态间保持平衡。IBD患者肠道菌群检测发现，Fn是IBD患者最常见的感染菌之一，IBD患者Fn检出率为50%，对照组检出率为17%，二者差异具有统计学意义[29]，这与之前的研究结果相符[32]。年有研究者报道，IBD患者炎症组织中Fn感染检出率为69%[30]，IBD患者炎症组织中分离出的Fn较正常对照组分离出的Fn菌株黏附、侵袭能力增强[29,33,34]，而IBD患者正常组织中分离出的Fn与正常对照组分离出的Fn侵袭力无明显差异[29,35]。Ohkusa等[36]报道，溃疡性结肠炎患者组织中提取的Fn可以在小鼠中成功诱导出实验性的炎性溃疡。同时研究发现，当Fn感染侵袭上皮细胞，导致粘液素分泌紊乱，引起肠道上皮屏障破坏，粘膜通透性增加，刺激肠上皮细胞释放白介素-8(IL-8)、白介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及CC类趋化因子-20(CCL-20)等炎症介质[36,37,38]，从而招募免疫细胞并引起免疫应答逐级放大，诱发强烈的炎症反应，最终导致组织损伤，IBD的发生机率增加。此外，Fn感染可抑制自噬相关蛋白16-1(ATG16L1)的表达，阻碍自噬体向自噬溶酶体成熟，减弱自噬体对Fn的清除作用，导致Fn持续感染并促进IBD的发生发展[39]。
2.3 Fn与结直肠肿瘤
很多学者对CRC与Fn间的相关性给予了北京治疗白癜风比较好的医院是哪家北京治疗白癜风比较好的医院是哪家
